本试剂盒采用碱裂解法提取质粒DNA,具有简单快速、高纯度、高得率等特点,适用于从大肠杆菌中提取质粒DNA。
产品特点:
操作简单快速,无需超速离心机,离心时间短,只需1小时即可完成质粒DNA提取。
提取的质粒DNA纯度高,适用于各种下游应用,如酶切、连接转化、测序等。
得率高,从5ml大肠杆菌菌液中可提取10-20μg质粒DNA。
试剂盒组分齐全,无需另购其他试剂,方便使用。
应用范围:
从大肠杆菌中提取质粒DNA
用于质粒DNA的酶切、连接、转化、测序等下游应用
试剂盒组成:
裂解液(含RNase A)
中和液
洗涤液
洗脱液
Elution Buffer
使用说明:
1. 收集菌液
将5ml大肠杆菌菌液离心收集菌体。
2. 裂解菌体
加入500μl裂解液,充分混匀,室温放置5分钟。
3. 中和裂解液
加入350μl中和液,充分混匀,室温放置5分钟。
4. 离心
12,000 × g离心5分钟。
5. 收集上清
将上清转移至新的离心管中。
6. 吸附质粒DNA
加入1ml洗涤液,充分混匀,室温放置1分钟。
7. 离心
12,000 × g离心1分钟。
8. 洗涤
用1ml洗涤液洗涤沉淀,充分混匀,室温放置1分钟。
9. 离心
12,000 × g离心1分钟。
10. 洗脱质粒DNA
加入50-100μl洗脱液,充分混匀,室温放置5分钟。
11. 离心
12,000 × g离心1分钟。
12. 收集质粒DNA
将上清转移至新的离心管中,即可得到质粒DNA。
注意事项:
裂解液和中和液含有腐蚀性物质,使用时请戴手套。
试剂盒中提供的洗涤液为浓缩液,使用前请按说明书稀释。
洗涤后应完全去除洗涤液,以免影响质粒DNA的纯度和得率。
储存条件:
试剂盒在室温下保存即可。